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    雏鸭病毒性肝炎的诊治与体会

    时间：2023-02-23 09:05:05来源：百花范文网本文已影响人

    顾振东

    （靖远县农业农村局农产品质量安全检验检测管理站，甘肃 白银 730600）

    雏鸭是整个养鸭过程的关键，关系后期鸭生长发育和生产性能的正常发挥。由于刚出生的雏鸭体质较弱，绒毛少，管理不当容易导致雏鸭感染病毒，危害其健康。鸭病毒性肝炎(Duck Virus Hepatitis，DVH)是由鸭肝炎病毒（DHV）引起雏鸭的一种常见传染病，具有传播速度快、病程较短、致死率高等特点。该病主要发生于3周龄以下雏鸭，潜伏期通常为1~2 d，死亡多在发病后的3~4 d。临床表现精神沉郁、抽搐、转圈以及角弓反张、全身性痉挛等神经症状，剖解有肝脏出血、肿胀、胆汁颜色较淡等病理变化。鸭肝炎分布范围比较广，在上世纪50年代有人用鸡胚分离出鸭肝炎病毒后，在世界各国逐渐蔓延开来。近年来，鸭肝炎呈大面积流行，部分毒株的毒性大幅增强，抗原性也逐渐发生变异，发病率和死亡率明显提高，严重危害了养鸭业的健康发展。因此，探究雏鸭病毒性肝炎有效的具体诊断与治疗方法，对防治该疾病具有重要的意义。

    2021年3 月本县养殖户李某从外地购买500羽1周龄的雏鸭，放入提前清扫消毒好的育雏室（用氢氧化钠2%～3%的水溶液内外环境消毒2次）进行饲养。雏鸭到场后用谷壳做垫料，并用4盏远红外线灯保温，饲喂全价配合饲料，自由采食。饲养到9日龄时，发现部分雏鸭精神萎靡、采食量减少，个别雏鸭不食、行动缓慢，有的出现腹泻，短短3 d已死亡55羽，另有35余羽患鸭病情严重，眼半闭呈昏迷状。

    发病突然，病程短促。病鸭初期主要表现精神萎靡、行动迟缓、闭眼蹲伏等症状，且走几步便俯卧在地上，食欲明显下降。发病12~24 h，出现运动失衡、全身抽搐、倒地、双腿痉挛、呼吸困难等一系列症状，有的患鸭侧头原地转圈，并在10 min后慢慢死亡；
    有的病鸭有腹泻症状，排白色或灰绿色稀粪便。

    病理变化主要发生在肝脏，患鸭肝脏肿大，色暗发黄，肝表面有不同大小的出血斑点，肝细胞变性及坏死，同时肝细胞脂肪变性。此外，大部分患鸭的肾脏出血、肿胀。

    4.1 临床诊断

    该病感染对象主要是雏鸭，尤其是3周龄以下的雏鸭；
    成年鸭不发病。雏鸭突然发病，逐渐精神萎靡，且无法跟群活动，大部分病鸭眼睛呈半闭状态，嗜睡症状明显。在上述症状出现后的1~3 h，病鸭表现运动失调，身体会不由自主的倒向一侧，双腿出现痉挛性运动，呈角弓反张。根据临床表现结合肝脏剖解病变，初步诊断为鸭病毒性肝炎。

    4.2 实验室诊断

    既有病毒分离、中和试验等常规方法，也有琼脂免疫扩散、ELISA方法、胶体金免疫电镜等免疫学方法，还有近几年得到推广和应用的PCR方法，养殖场可以根据自己的情况选择合适的诊断方法。

    4.2.1 病毒分离 这是实验室比较常用的方法。可无菌取雏鸭肝脏加适量生理盐水和青、链霉素各500 U研磨制成组织悬液，离心取上清液，经尿囊腔接种8~10日龄鸭胚，每胚0.2 mL，继续孵育，密切观察胚体病变和死亡状况，大约2周内接种鸭胚全部死亡，死胚主要表现为皮肤出血、水肿，肝脏肿胀、颜色变暗绿、表面有针尖大的出血斑点[1]；
    对照组存活。同时收集上述死亡鸭胚的尿囊液接种10日龄健康雏鸭，24 h内雏鸭出现DVH典型症状，并能从24~48 h后死亡雏鸭中分离出该病毒。

    4.2.2 中和试验 该方法特异性高，是诊断鸭肝炎病毒的经典方法。鸭病毒性肝炎病毒可在鸡胚上进行血清中和试验，虽然该方法复杂、繁琐、费时，但在诊断鸭病毒性肝炎的流行病学调查和抗体监测中仍有切实的应用价值。王作友等[2]通过鸡胚中和试验进行鸭病毒性肝炎的抗体水平检测，试验结果表明选择合适的鸡胚适应毒株对鸡胚中和试验非常关键和重要，是保证实验结果真实可靠的基础。雏鸭中和试验是以易感雏鸭为试验对象，雏鸭感染后的发病症状和病变对确诊该病有很大说服力。该方法灵敏度高，判断准确，与鸡胚中和试验相比，所需周期短，操作相对简单，但由于鸭个体之间的差异，对病毒的抵抗力不同，所以重复性较差。

    4.2.3 琼脂凝胶免疫扩散试验（AGID试验） 该方法敏感性不高，但对试验要求较低，在基层易于推广，对本病的诊断还是有一定的应用价值。早在1998年，孙泉云等[3]就建立了一种检测鸭肝炎病毒抗原的AGID方法，该方法不仅能够在临床上对本病与鸭黄曲霉毒素中毒、沙门氏菌病等进行鉴别诊断，而且具有试验特异性；
    此外，试验中对病毒抗原的处理方式（病毒材料经过氯仿、PEG透析和硫酸铵等方法处理）既避免了杂蛋白干扰又提高了病毒纯度，提高了试验的灵敏度，有助于病毒的检出。

    4.2.4 胶体金标记免疫电镜技术 该技术是目前应用最广的免疫电镜技术是用胶体金颗粒带负电的特性吸附抗体，从而将抗体标记，再利用其与许多生物大分子共价结合作为二抗，用于免疫电镜负染技术检测相应抗原。与直接电镜观察相比，胶体金免疫电镜下的背景杂质很少，视野中附着金颗粒的病毒量多且清晰可见，易于辨认，定位比酶反应物更精确，大大提高了病毒快速诊断的敏感性和特异性。程安春等[4]建立的胶体金免疫电镜技术检测鸭肝炎病毒的效果很理想，具有简便、快速、灵敏、直观等特点，可以作为DHV的常规检测方法。

    4.2.5 SPA协同凝集试验（SPA-CoA） SPA（葡萄球菌A蛋白）是金黄色葡萄球菌细胞壁上的一种表面蛋白，能与特异性抗体IgG的Fc片段结合，而不影响Fab片段的活性，所以以SPA作为抗体致敏的载体与相应抗原接触，即出现反向间接凝集反应，使结果更易于观察。王铭书等[5]用富含A蛋白的金黄色葡萄球菌1800株致敏兔抗DHV IgG，建立了检测鸭肝炎病毒（DHV）的SPA协同凝集试验，试验表明最佳的检测部位为肝脏（检出率100%），检出抗原的最低含量为0.4 mg/mL，虽比Dot-ELISA检测DHV最低抗原量（0.04453 mg/mL）的敏感性低，但用于临床及基层兽医诊断其敏感性已经足够，此方法简便、快速、便于推广应用。

    4.2.6 ELISA方法 ELISA原理是采用抗原与抗体的特异结合将被测物质与酶标抗体进行直接或间接结合，然后通过标记酶与底物产生颜色反应进行定性和定量分析。但在实际应用中需要根据抗体抗原的特性设计不同的检测法，如双抗夹心法、单抗捕捉ELISA法、酶标Dot-ELISA[6]、间接ELISA[7]等，这些检测方法灵敏度比较高、操作便捷、特异性也更强，能够用于鸭病毒性肝炎临床病料和抗体的特异性检测。

    4.2.7 PCR 方法 PCR方法具有高度敏感、快速、特异、操作简单、易标准化等技术优势，且可以检测病原体中特异性的核苷酸序列，比常规诊断方法更能在生产中得到广泛的推广和应用。目前为了对鸭病毒性肝炎进行快速、准确的诊断，建立了各种PCR方法，如常规RT-PCR方法[8]、多重PCR方法[9]、鉴别RT-PCR方法[10]、荧光定量PCR方法[11]等，非常适用于Ⅰ型鸭肝炎病毒（DHV-Ⅰ）临床大量样品的快速诊断、鉴别诊断和分子流行病学的调查研究。

    5.1 加强饲养管理

    该病的治疗目前尚无有效药物，重在日常预防。发病后第一时间隔离病鸭，与健康鸭分开饲养。处死无治疗价值的病鸭，病死鸭及其污染物一起进行无害化处理；
    对鸭舍内外环境、饲养工具等用3%苛性钠溶液或0.2%过氧乙酸彻底消毒。保持鸭舍干燥卫生、通风良好以及温湿度适宜、饲养密度合理等，更换无污染的新垫料，禁止外来人员随意进入鸭场，尽量减少应激因素；
    同时给鸭群提供营养丰富的全价配合饲料和清洁饮水，并在饮水中添加葡萄糖和复合维生素供其自由饮用。

    5.2 主动免疫

    5.2.1 弱毒疫苗 种鸭：一般在产蛋前1个月皮下注射1 mL鸡胚传代致弱后制成的DHV疫苗，获得免疫的种鸭所产种蛋孵出的雏鸭能够获取母源抗体保护，保护期在2周左右；
    在10日龄时对雏鸭加强免疫1次，可取得不错的免疫效果。对没有母源抗体的雏鸭或母源抗体不明的引入鸭群，可在1日龄接种弱毒疫苗，3~7 d即可产生免疫力，后期根据实际情况检测抗体水平，确定第二次免疫时间。当在某些地区出现DHV-I变异株，使用标准DHV-I型弱毒疫苗进行免疫会发现免疫效果并不好，这是因为病毒变异后在血清学上可能存在某些差异，无交叉免疫性。

    5.2.2 灭活疫苗 分为鸡胚组织灭活苗和鸭胚组织灭活苗。有研究表明，鸭胚灭活苗的免疫效果要明显好于鸡胚灭活苗，但如果鸭没有进行弱毒苗基础免疫，只免疫了灭活苗，则鸭体内的抗体水平会很低。由于母源抗体的存在会影响免疫效果，因此没有母源抗体的雏鸭才可以进行免疫；
    对引入的雏鸭在母源抗体情况不明时可通过肌肉注射高免血清获取保护力。有试验使用鸭浆膜炎、鸭病毒性肝炎二联灭活疫苗免疫2周龄雏鸭，结果显示该二联疫苗对2 周后鸭病毒性肝炎保护力达78以上，免疫保护期可达12 周以上。

    5.3 被动免疫

    生产上一般是将鸭DVH病毒油乳剂灭活苗接种于鸡来获取特异性卵黄抗体。出壳鸭苗在24~28 h内皮下注射鸭病毒性肝炎高免卵黄液或康复鸭血清（当中含有能够有效中和病毒的抗体），用于治疗病鸭或进行被动免疫，效果良好。有试验报道，给1日龄雏鸭皮下注射抗鸭病毒性肝炎二价（Ⅰ＋Ⅲ型）高免抗体，可有效预防Ⅰ型和Ⅲ型鸭病毒性肝炎。

    5.4 中草药 使用荆防败毒散（荆介、防风、羌活、独活、银花、连召、柴胡、枳 壳、川芎、竹叶、甘草等组成）拌料辅助治疗3 d，可获得很好的治疗效果，鸭群死亡停止，病情逐渐好转；
    或将茵陈、龙胆草、黄芩、黄柏、金银花、板蓝根、栀子、柴胡、防风、钩藤、神曲、荆芥、甘草等13味中药按比例煎煮两次，两次煎液合并浓缩至含生药0.5 g/L治疗鸭病毒性肝炎，其效果与高免卵黄抗体相当，而且不易复发。

    雏鸭病毒性肝炎是一种急性传染疾病，主要是通过呼吸道以及消化道传染，可经过病鸭的分泌物、被污染的水、饲料用具等进行传播，饲养管理不当、鸭群缺乏维生素以及矿物质、饲养密度太大、鸭舍环境潮湿、卫生条件比较差等诱发或加重病情。流行初期，应当及时注射高免卵黄液或康复鸭血清，同时辅以疏肝理气、调整气血、清热解毒的中草药治疗，这样能够有效预防感染，并且明显减少死亡。

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