TURBT联合吉西他滨对膀胱癌患者SVEGFR1、IGFBP-3、IMP3表达的影响
蔡仙国 卢子文 李卫林 吴宏剑
[摘要] 目的 探討尿道等离子电切术(TURBT)联合吉西他滨对膀胱癌患者的可溶性血管内皮生长因子受体1(SVEGFR1)、血清胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)、胰岛素样生长因子Ⅱ mRNA结合蛋白3(IMP3)表达的影响。
方法 收集2015年1月~2018年4月浙江省台州医院泌尿外科治疗的101例膀胱癌患者资料并进行回顾性分析,随机分为对照组与研究组,对比两组的临床疗效。采用酶联免疫吸附法检测SVEGFR1水平、全自动化学发光分析仪测定IGFBP-3水平、免疫组化法测定IMP3水平。
结果 治疗后,血清DKK1、CYFRA21-1、VEGF水平降低,IGFBP-3水平升高,相比对照组,研究组SVEGFR1、IMP3、DKK1、CYFRA21-1、VEGF水平较低,IGFBP-3水平较高(P<0.05);对照组术后1年、3年复发率及复发时间均较高于研究组,研究组不良反应总发生率高于对照组(P>0.05)。
结论 TURBT联合吉西他滨治疗可提高膀胱癌患者的治疗效果,可延长膀胱癌患者的生存时间,且毒副作用小,安全性较好,值得临床推广。
[关键词] 尿道等离子电切术;吉西他滨;膀胱癌;影响
[中图分类号] R699.2 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701(2022)17-0015-04
Effects of TURBT combined with gemcitabine on expression of SVEGFR1, IGFBP-3 and IMP3 in patients with bladder cancer
CAI Xianguo LU Ziwen LI Weilin WU Hongjian
Departmentof Urology Surgery,Taizhou Hospital of Zhejiang Province affiliated to Wenzhou Medical University, Taizhou 317000,China
[Abstract] Objective To investigate the effect of Human soluble vascular endotherial growth factor receptor1(SVEGFR1) urethral plasmakinetic resection (TURBT) and gemcitabine on the expression of insulin-like growth factor binding protein -3 (IGFBP-3) and insulin-like growth factor II mRNA binding protein 3 (IMP3) in patients with bladder cancer. Methods A total of 101 patients with bladder cancer treated were collected in Departmentof Urology Surgery,Taizhou Hospital of Zhejiang Province affiliated to Wenzhou Medical University from January 2015 to April 2018 and analyzed retrospectively. They were randomly divided into the control group and the research group, and the clinical efficacy of the two groups was compared. The levels of svegfr1, IGFBP-3 and IMP3 were measured by enzyme-linked immunosorbent assay, automatic chemiluminescence analyzer and immunohistochemistry. Results After treatment, the levels of serum DKK1,CYFRA21-1 and VEGF decreased and the levels of IGFBP-3 increased. Compared with the control group, the levels of SVEGFR1,IMP3, DKK1,CYFRA21-1 and VEGF in the study group were lower and the levels of IGFBP-3 were higher(P<0.05);The recurrence rate at 1 and 3 years after operation in the control group was higher than that in the study group, and the total incidence of adverse reactions and tine to relapse in the study group was higher than that in the control group(P>0.05). Conclusion TURBT combined with gemcitabine can improve the therapeutic effect of bladder cancer, prolong the survival time of patients with bladder cancer, and have less toxic side effects and better safety, which is worthy of clinical promotion.
[Key words] Plasma electrourethral resection; Gemcitabine; Bladder cancer; Impact
膀胱癌是发生在膀胱黏膜上的惡性肿瘤形成,是临床最常见的恶性肿瘤之一[1,2]。膀胱癌的原因与长期吸烟有关,除此之外受慢性感染、个人饮食等原因都易导致,给患者机体功能、身心健康和生活质量造成巨大危害[3,4]。早期的膀胱癌是局限在膀胱黏膜的,常采用经尿道的膀胱肿瘤电切术进行治疗,但复发率稍高,单一治疗效果不理想[5]。吉西他滨作为一种化疗药,主要用于治疗局部晚期或已有转移的非小细胞肺癌和胰腺癌,疗效显著[6]。近年来研究发现可溶性血管内皮生长因子受体1(SVEGFR1)、血清胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)、胰岛素样生长因子Ⅱ mRNA结合蛋白(IMP3)在膀胱癌患者血清中存在异常表达,但临床采用药物治疗膀胱癌患者对SVEGFR1、IGFBP-3、IMP3水平影响的相关报道较少[7,8]。基于此,本研究通过对膀胱癌患者采用TURBT、吉西他滨联合治疗,分析其对SVEGFR1、IGFBP-3、IMP3表达的影响,现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
收集2015年1月~2018年4月浙江省台州医院泌尿外科治疗的101例膀胱癌患者资料,随机分为对照组50例与研究组51例。研究组男31例,女20例,年龄28~85岁,平均(56.5±22.8)岁;对照组男29例,女21例,年龄29~84岁,平均(56.5±22.0)岁。膀胱癌分为Ⅰ期55例、Ⅱ期56例。两组的性别、年龄等临床资料比较,差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。本研究已通过医院医学伦理委员会批准,患者及家属均知情同意。
纳入标准:①经病理学诊断为膀胱癌;②病灶直径0.7~2.6 cm;③化疗前血常规及心电图、肝肾功能无异常者。排除标准:患有心、肝、肺、肾、免疫系统性等疾病者;②非原发性膀胱癌且合并其他恶性肿瘤者;③意识模糊不清或患有精神疾病,不能够积极配合完成治疗者;④对本研究药物过敏者。
1.2 方法
两组均进行尿道等离子电切术(TURBT)治疗,患者平躺于治疗床,取截石位,全身麻醉,消毒铺巾后经尿道置入GYRUS电切镜确认病灶位置、大小、数量,使用0.9% NaCl溶液冲洗,从肿瘤表面彻底切除至基底层,对膀胱肿瘤蒂部周围约2 cm范围进行处理,电凝止血,冲洗送检,使用0.9% NaCl溶液冲洗,无出血置入导尿管,留置7d。对照组术后7d使用30 mg吡柔比星(浙江海正药业股份有限公司,国药准字H20045982)溶于50 ml 0.9% NaCl溶液进行稀释灌注治疗。研究组术后7d给予吉西他滨膀胱灌注治疗,灌注前嘱患者排空膀胱尿液,取截石位,将1.2 g吉西他滨(江苏豪森药业集团有限公司,国药准字H20030104)于40 ml 0.9%NaCl溶液进行稀释,嘱患者适当变换体位,保留1 h后排出。两组治疗时间均为每周1次,2个月后改为每个月1次,持续治疗1年。
1.3 观察指标及随访
1.3.1 因子测定 于治疗前及治疗1年后抽取两组患者晨间空腹静脉血5 ml,3000 r/min离心10 min,-80℃冰箱保存备用。酶联免疫吸附法检测SVEGFR1、DKK1、CYFRA21-1、VEGF水平。试剂盒购自上海机纯实业有限公司。将标本血清自冰箱取出,室温放置30 s,备置标准血清及溶液,300 μl洗板液洗板30 s,微孔拍干,导入50 μl检测缓冲液,将50 μl标准液及样本和检测抗体放置微孔,封板,震荡,室温(37℃)孵育2 h,洗板,100 μl的酶标记物导入检测孔,封板,震荡,放置室温内45 min,洗板,将100 μl底物液加入微孔,遮光孵育30 min,加入100 μl终止液,震荡,采用酶标仪在450 nm处测吸光值。采用免疫组化法测定IMP3水平。石蜡切片脱蜡、水化后清洗3次,95℃柠檬酸盐缓冲液(pH 6.0)加热,30 min后取出,PBS液清洗。加0.3%过氧化氢,4%脱脂奶粉,孵育30 min,PBS清洗3次,滴加山羊血清,26 ℃培养0.5 h,添加一抗(1∶1000),4 ℃孵育过夜,PBS液清洗,滴加二抗兔抗羊IgG(1∶1000),孵育30 min,与抗生物素蛋白-生物素-过氧化物酶复合物,孵育30 min,PBS液清洗,DAB显色处理8 min,苏木精染核,反蓝、脱水处理后封片,显微镜观察(200倍),使用ImageJ软件分析ANXA10、FOXM1、CD63表达的积分光密度值。IGFBP-3采用MAGLUMI2000全自动化学发光分析仪(武汉医盾医疗器械有限公司)测定。
1.3.2 随访 术后随访半年,51例膀胱癌患者进行随机随访20例,随访率为39%,其中随访应答17例,应答率为85%;记录两组术后1、3年复发率和复发时间及并发症发生率;统计并记录患者的不良反应发生情况及复发预后情况,包括腹泻、皮疹、恶心等。
1.4 统计学方法
应用SPSS 21.0统计学软件处理数据,计量资料以均数±标准差(x±s)表示,组间比较采用t检验,计数资料用[n(%)]表示,采用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两组临床资料分析
两组患者临床资料比较,差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。
2.2 两组血清肿瘤标志物水平比较
治疗后,患者血清DKK1、CYFRA21-1、VEGF水平降低,且研究组DKK1、CYFRA21-1、VEGF水平较低于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。见表2。
2.3 两组血清SVEGFR1、IGFBP-3、IMP3水平比较
治疗后,患者血清SVEGFR1、IMP3水平降低,IGFBP-3水平升高,相比对照组,研究组SVEGFR1、IMP3水平较低,IGFBP-3水平较高,差异有统计学意义(均P<0.05)。见表3。
2.4 两组患者预后情况比较
对照组术后1、3年复发率及复发时间均高于研究组,差异有统计学意义(均P<0.05)。见表4。
2.5 两组不良反应比较
治疗后,研究组不良反应总发生率(13.73%)略高于对照组(12.00%),但差异无统计学意义(P>0.05)。见表5。3 讨论
膀胱癌是一种常见的恶性肿瘤,其发病率占我国男性泌尿生殖系统的首位。膀胱癌主要表现为血尿、尿频尿急尿痛和排尿困难或上尿路梗阻等症状[9,10]。因此,根据患者机体不同状态,确定不同的治疗方案,具有重要价值。
本结果显示,治疗后膀胱癌患者DKK1、CYFRA21-1、VEGF水平降低,提示联合治疗可发挥协同作用,可减少术后复发和浸润现象,疗效显著。研究显示,血清DKK1、CYFRA21-1及VEGF可作为判断肿瘤活性的参考指标[11]。TURBT具有操作简便、安全性高、可缩短术后恢复时间、术中术后出血少等优点,唯一不足之处在于术后1年极易复发[12]。大量研究显示,治疗后膀胱癌复发的原因与临床治疗手段、机体免疫力差、残留肿瘤细胞及浸润程度等有关[13,14]。因此,术后行膀胱灌注化疗可减少复发率,杀灭残留肿瘤细胞,且术后早期灌注化疗疗效比常规灌注化疗疗效显著[15]。本研究显示,联合治疗可降低复发率及患者体内血清DKK1、CYFRA21-1、VEGF表达水平,进而达到抑制肿瘤生长的目的,与上述研究结果基本一致。
IMP3是一种分泌性蛋白,可结合胰岛素样生长因子抑制细胞增殖、促进细胞凋亡等[16]。SVEGFR1是血管内皮生长因子受体(VEGF)的抑制剂,可通过抑制VEGF与膜表面受体结合,进而抑制肿瘤血管生成[17]。经研究证实,恶性肿瘤的发生发展与SVEGFR1、IMP3、IGFBP-3相关[18]。刘继普等[19]发现,VEGF在膀胱癌患者表达较高,且随着T分期增加,VEGF表达越高。有研究发现,肿瘤分级越高、T分期越晚、肿瘤复发率越高,IMP3蛋白阳性表达率及SVEGFR1表达就越高,表明肿瘤的恶性程度与IMP3、SVEGFR1表达有关;IGFBP-3表达与之相反、相关分析结果显示,IMP3蛋白表达阳性是膀胱癌患者预后的独立危险因素,进一步表明IMP3表达参与膀胱癌疾病过程[20]。石光英等[21]在相关研究中显示,肝癌患者血清IGFBP-3水平下降,术前IGFBP-3低水平是肝癌早期复发的危险因素。本研究显示,TURBT、吉西他滨联合应用治疗后膀胱癌患者SVEGFR1、IMP3水平下降,IGFBP-3水平升高,且联合治疗疗效优于单一治疗,提示SVEGFR1、IGFBP-3、IMP3表达在膀胱癌疾病的发生、发展中具有重要意义。
综上所述,TURBT联合吉西他滨应用可提高膀胱癌患者的治疗效果,抑制SVEGFR1、IMP3水平,上调IGFBP-3水平,可延长膀胱癌患者的生存时间,且毒副作用小,安全性较好,值得临床推广。但本研究样本纳入量较小,可能会使研究结果有偏差,需进一步加大样本量深入研究确认。
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(收稿日期:2021-10-14)
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