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    端粒酶和CD147在原发性肝细胞癌中的表达及意义

    时间：2023-06-27 16:30:09来源：百花范文网本文已影响人

    陈文芳 王为东

    蒙阴县人民医院病理科 山东 临沂 276200

    原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC)的发病率和死亡率分别位于我国恶性肿瘤的第四位和第三位[1]，严重威胁人类的健康。本研究选取端粒酶和CD147作为病理指标，对HCC和癌旁组织中端粒酶及CD147的表达与临床病理指标之间的关系进行对比，探讨其与HCC发生、发展及预后的关系。

    1.1 材料 选自我院病理科2010年1月至2014年12月经常规石蜡处理的353例HCC组织及81例癌旁组织。在353例原发性HCC中去除因术后失访、组织脱片等原因81例，剩余272例进行处理。272例HCC中男性228例，女性44例；
    年龄最大82岁，最小27岁，平均年龄为(55.03±2.05)岁，中位年龄为55岁；
    组织学分级高中分化179例，低分化93例；

    pTNM分期I/II期242例，III期30例。以上指标连同病人性别、年龄、淋巴结转移、脉管癌栓等其他临床病理因素一起纳入分析。

    1.2 实验方法

    1.2.1 组织芯片的构建 本研究利用组织芯片制片机对HCC典型肿瘤部位和癌旁组织进行取样，应用辽宁朝阳恒泰科技发展有限公司出品的恒泰组织芯片制备系统HT-1型制片，取样针直径为2.0 mm，组织芯片间距为1.0 mm。

    1.2.2 免疫组化染色 应用免疫组化SP染色法，兔抗人多克隆抗体Telomerase及鼠抗人单克隆抗体CD147购自北京中山金桥生物公司，二抗购自罗氏生物公司。采用罗氏Bench Mark GX 全自动免疫组化染色机染色，用PBS缓冲液代替一抗作为阴性对照。

    1.3 结果判定 端粒酶定位于细胞核，CD147定位于细胞膜和细胞质。根据染色强度和阳性细胞所占百分比进行综合判断。将染色强度分为4级，分别为0～3分，不着色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分。细胞阳性百分数分为5级，分别为0～4分，阳性细胞数<5%为0分，5%～25%为1分，26%～50%为2分，51%～75%为3分，>75%为4分。然后将两者相乘，0～3分为“-”，4～12分为“+”。

    1.4 统计学方法 应用SPSS 17.0软件进行处理。定性资料采用χ2检验和pearson相关分析，生存分析采用Kaplan-Meier和Log-rank检验。P<0.05为差异具有统计学意义。

    2.1 端粒酶、CD147在HCC及癌旁组织中的表达 HCC和癌旁组织中端粒酶阳性表达例数比较，χ2=54.930，P<0.01。HCC和癌旁组织中CD147阳性表达例数比较，χ2=34.572，P<0.01(表1)。

    表1 不同肝脏组织中端粒酶、CD147的表达情况

    2.2 端粒酶、CD147的表达与临床病理指标的关系 端粒酶的表达与无瘤生存时间、组织分级、肿瘤大小、是否有卫星灶、组织癌栓及临床分期相关，P<0.05或<0.01，与其它因素无关。CD147的表达与患者的组织分级、临床分期、无瘤生存时间、肿瘤大小、脉管或/和门静脉癌栓相关，P<0.01，与其他因素无关(表2，图1、2)。

    2.3 端粒酶、CD147在HCC中的表达与术后无瘤生存和总生存的关系 Kaplan-Meier和Log-rank检验显示，端粒酶、CD147阳性表达患者的术后无瘤生存及总生存均缩短，P<0.01(表3，图3、4)。

    图1 端粒酶在HCC中的阳性表达(HE×100) 图2 CD147在HCC中的阳性表达(HE×100)

    表2 原发性肝细胞肝癌中端粒酶、CD147的表达与临床病理参数的关系

    表3 端粒酶和CD147的表达情况与无瘤生存和总生存期的关系

    图3 HCC中端粒酶表达的生存曲线/月 图4 HCC中CD147表达的生存曲线/月

    在肿瘤的发生、发展过程中，特别是在肿瘤的起始阶段，癌细胞的永生化起到关键性的作用，也对肿瘤的生长和转移具有重要的影响。端粒酶使细胞染色体的端粒延长，使细胞不断分裂、增殖[2]。端粒DNA是富含鸟苷酸的简单串联重复序列(TTAGGG)。在细胞不断复制的过程中，端粒不断缩短，使细胞复制终止。为了避免端粒因缩短而导致的复制终止，真核细胞存在一种特殊的逆转录酶—端粒酶，其作用是将DNA重复序列添加到染色体3′末端以对抗端粒的持续降解。它是一种核蛋白复合物，作用是为端粒DNA的延长提供RNA模板序列[3]。端粒酶保持持续的活性使端粒的长度保持在稳定的状态，从而使细胞获得无限复制的能力。在正常情况下，有活性的端粒酶主要存在于精子细胞、干细胞和胚胎细胞中[4]，某些恶性肿瘤细胞重新恢复了端粒酶活性，使细胞无限增殖而演变为恶性肿瘤。端粒酶在结直肠癌、鼻咽癌、子宫颈癌及黑色素瘤中均有高表达[5]，与本研究结果相似。本研究还发现端粒酶阳性表达与HCC患者的术后肿瘤复发时间、组织分级、癌栓和临床分期等有关，即端粒酶的阳性表达与HCC患者的不良预后相关。

    CD147又称为细胞外基质金属蛋白酶诱导因子，是免疫球蛋白超家族(immunoglobulin supperfamily，IGSF)单链跨膜糖蛋白。其分子量为58 kD，其基因定位于染色体19p13.3[6]，在恶性肿瘤的转化、浸润转移以及肿瘤新生血管的生成中均发挥重要作用[6]。CD147在甲状腺癌、乳腺癌、胃癌等多种恶性肿瘤中高表达，且预后不良[7]，与本研究结果一致。本研究发现CD147的高表达与HCC的组织学分级、临床分期、脉管癌栓等因素相关，因此，CD147也可以作为判断肿瘤预后的因子之一。在多耐药的肿瘤细胞中CD147的表达是增加的，并且CD147的高表达可以致使细胞对某些抗肿瘤药物产生抵抗[8]，导致抗肿瘤治疗不佳，理论上，抑制肿瘤细胞中CD147的表达可以增加癌细胞对抗肿瘤药物的敏感性，可以成为肿瘤治疗的一个靶点。因此，如何抑制CD147的表达成为抗癌治疗的研究热点。汤北岭等[9]研究认为，下调CD147蛋白的表达能够抑制肿瘤细胞的增殖，并成功诱导了胃癌细胞的凋亡，抑制CD147基因表达可以成为胃癌治疗的一个靶点。CD147是否可以成为治疗其它恶性肿瘤的有意义的靶点，也是医学界今后的研究方向之一。

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