云南省金平县芒人高脂血症与HLA-B、HLA-DR基因多态性研究
黄娟,刘丽,何俊梅,白世光,李红,金兰花,刘宇,李久龙,金吕飞
1.昆明医科大学第五附属医院风湿免疫科,云南个旧 661000;
2.云南省金平县人民医院内科,云南金平 661500
近年来,随着人们生活水平的提高,中国人群的血脂水平也逐步上升。2012 年全国调查结果显示,全国血脂异常的患病率已高达40.4%,其中高胆固醇血症的患病率为4.9%,高三酰甘油血症的患病率为12.1%[1]。除了某些疾病及药物引起的继发性高脂血症外,原发性高脂血症大多是由于不良生活习惯(如吸烟、饮酒、高脂高糖饮食等)和单个或多个基因突变引起。HLA 是公认的最具复杂多态性的基因系统,各民族间HLA 多态性分布具有其各自的特点。目前,多种疾病都被证实与HLA 密切相关。为探讨少数民族地区人群血脂异常是否与HLA 相关联,该次对2020 年8—12 月期间收集的202 名云南省金平县芒人进行血脂异常与HLA-B、HLA-DR 基因分型的研究。现报道如下。
1.1 研究对象
对云南省金平县金水河镇的龙凤村、坪河村、雷公打牛村共3 个自然村的16 岁以上且自愿参与调查的芒人居民,排除外出务工、精神异常者以及怀孕妇女,共202 名,其中男102 名,女100 名。
1.2 诊断标准
根据《中国居民营养与慢性病状况报告(2015)》,高三酰甘油(triglycerides,TG)血症中TG≥1.70 mmol/L,TC<5.72 mmol/L;
高胆固醇血症(total cholesterol,TC)中TC≥5.72 mmol/L,TC<1.70 mmol/L;
混合型高脂血症定义为TG≥1.70 mmol/L,TC≥5.72 mmol/L。本文中,高TG定义为TG≥1.70 mmol/L,高TC 定义为TC≥5.72 mmol/L。
1.3 标本采集和检验
采用普查的方法,结合村委会的常住人口花名册,由当地村干部在指定调查日期召集至村会议室,要求受检者空腹10 h 以上,次日8:00 开始采集EDTA 抗凝全血及促凝全血各5 mL,促凝全血集中离心处理后送至昆明医科大学第五附属医院生化室进行血清三酰甘油及血清胆固醇的测定,EDTA抗凝全血送至昆明医科大学第一附属医院风湿免疫科实验室进行外周血DNA 提取,采用寡聚核苷酸探针方法(PCR-SSO)进行DNA 扩增和样本杂交后,用luminex200 机器读取数据,数据导入Labtype 软件进行HLA-B 位点、HLA-DR 位点等位基因和血清型分型。调查过程符合《昆明医科大学医学伦理》要求,并明确告知调查内容及其利弊,签署知情同意书。
1.4 仪器与试剂
采用贝克曼5800 全自动生化分析仪。三酰甘油、胆固醇试剂盒由日本积水医疗株式会社提供。采用PCR system 9700 仪(赛默飞世尔科技有限公司)、Luminex 200(美国ZEUS 公司)、5424R 小型台式高速冷冻离心机(EPPENDORF 公司)、震荡仪(江苏天力医疗器械有限公司)、转速4 000 rpm 离心机(江苏江堰有限公司)、电热恒温温箱(江苏天力医疗器械有限公司)。血液等位基因组DNA 提取试剂盒(北京天根公司)、序列特异性寡核苷酸探针法(One lambda 公司)、taqDNA 聚合酶(One lambda 公司)、无水乙醇(天津市化学试剂三厂)。
1.5 统计方法
采用SPSS 23.0 统计学软件处理数据,计数资料以[n(%)]表示,组间差异比较采用χ2检验,等级资料采用秩和检验。P<0.05 为差异有统计学意义。
2.1 高脂血症的患病情况分析
本研究中202名芒人TG的平均值为1.43 mmol/L,TC 的平均值为4.59 mmol/L。高TG 组共54 名,男29 名,女25 名;
高TC 组共28 名,男13 名,女15 名;
TC 及TG 均升高组共11 名(男5 名,女6 名);
血脂正常组共131 名,男65 名,女66 名。高脂血症的总患病率为35.1%(男36.3%;
女34.0%);
高TG 的患病率为26.7%(男28.4%;
女25.0%);
高TG 的患病率为13.9%(男12.7%;
女15.0%)。男女间高TG、高TC 患病率差异无统计学意义(P>0.05)。各年龄段高TG、高TC 患病率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。
表1 不同性别及年龄段高TG 和高TC 的患病情况分析[n(%)]
2.2 HLA-B、HLA-DR 等位基因的优势基因分布
排除15 例(高TG 组有6 例,高TC 组有2 例,血脂正常组有8 例)未检测出HLA-B 等位基因;
25 例(高TG 组有11 例,高TC 组有4 例,血脂正常组有13例)未检测出HLA-DR 等位基因,共检测出19 种HLA-B 位点等位基因、14 种HLA-DRB1 位点等位基因。其中,HLA-B*40:01 是HLA-B 基因中携带人数最多的基因型,占30.2%;
HLA-DR*12:02 是HLA-DR 基因中携带人数最多的基因型,占34.5%。
2.3 高TG 与HLA-B、HLA-DR 等位基因的关联
云南省金平县芒人高TG 组HLA-B*13:01 频率显著高于血脂正常组,差异有统计学意义(P<0.05),携带该基因的芒人罹患高TG 的风险高于未携带者。HLA-B*40:02 频率显著低于血脂正常组,差异有统计学意义(P<0.05),携带该基因的芒人罹患高TG 的风险低于未携带者。高TG 组与正常组间的HLA-DR 等位基因差异无统计学意义(P>0.05)。见表2、表3。
表2 云南省金平县芒人高TG 组与血脂正常组HLA-B 位点等位基因频率比较[n(%)]
表3 云南省金平县芒人高TG 组与血脂正常组HLA-DRB1 位点等位基因频率比较[n(%)]
2.4 高TC 与HLA-B、HLA-DR 等位基因的关联
高TC 组与正常组间的HLA-B、HLA-DR 等位基因差异无统计学意义(P>0.05)。见表4、表5。
表4 云南省金平县芒人高TC 组与血脂正常组HLA-B 位点等位基因频率比较[n(%)]
表5 云南省金平县芒人高TC 组与血脂正常组HLA-DRB1 位点等位基因频率比较[n(%)]
2.5 高TG 与HLA-B、HLA-DR 血清型的关联
共检测出12 种HLA-B 位点血清型、8 种HLADRB1 位点血清型。高TG 组与血脂正常组间的HLA-DR 血清型差异无统计学意义(P>0.05)。见表6。高TG 组的HLA-B13 血清型频率显著高于血脂正常组,差异有统计学意义(P<0.05),携带该血清型的云南省金平县芒人罹患高TG 的风险高于未携带者;
高TG 组的HLA-B15 血清型频率显著低于血脂正常组,携带该血清型的芒人罹患高TG 的风险低于未携带者。见表7。
表6 云南省金平县芒人高TG 组与正常组HLA-DR 血清型比较[n(%)]
表7 云南省金平县芒人高TG 组与正常组HLA-B 血清型比较[n(%)]
2.6 高TC 与HLA-B、HLA-DR 血清型的关联
高TC 组与血脂正常组的HLA-DR 血清型差异无统计学意义(P>0.05)。见表8。高TC 组的HLAB15 血清型频率显著高于血脂正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。携带该血清型的云南省金平县芒人罹患高TC 的风险高于未携带者。见表9。
表8 云南省金平县芒人高TC组与正常组HLA-DR血清型比较[n(%)]
表9 云南省金平县芒人高TC组与正常组HLA-B血清型比较[n(%)]
遗传相关的高脂血症一般是由单个或多个基因突变引起。HLA 复合物位于第6 号染色体上,具有多等位基因、高度多态性、单倍型遗传、连锁不平衡的特征,是人类最复杂的基因系统,其分布与人种、民族密切相关。目前,HLA 已被证明和多种疾病显著相关,比如强直性脊柱炎[2]、类风湿关节炎[3]、系统性红斑狼疮[4]等。那么,HLA 是否也参与了高脂血症的形成呢?日本一项研究证明HLA-DRB1*14:03可能是女性高胆固醇的危险因素[5],国内张印则等[6]发现家族性高胆固醇和HLA-DRB1*03、HLADRB1*11 呈强正相关,而与HLA-DRB1*12、HLADRB1*15 呈强负相关。但陈万春等[7]研究中并未发现HLA 与高胆固醇血症有明显相关性。然而,近期我国台湾在关于高脂血症、性别和HLA-B 基因的联系性研究中则有了阳性发现[8]。以上研究显示,高脂血症与HLA-B、HLA-DR 基因多态性是具有一定关联的。但是,对于HLA 分型对高脂血症的发生是否具有预测作用还需扩大样本量深入分析。
对云南省金平县芒人-我国少数民族中人口最少的一个小群体(共900 余人)进行高脂血症的流行病学调查,结果表明,该民族高脂血症的粗患病率为35.1%,其中TG 的平均值为1.43 mmo/L,高TG的患病率为26.7%,TC 的平均值为4.59 mmol/L,高TC患病率为13.9%,血脂水平及患病率均高于2012 年的全国调查结果。2012—2015 年我国35 岁以上人群血脂分布特点为男性高于女性[9],而在芒人群体中尚未发现限制的性别及年龄分布特点。
为进一步探索高脂血症与HLA 基因的联系,本次研究采用PCR-SSO 对云南省金平县芒人高TG、高TC 人群的HLA-B、HLA-DR 基因多态性进行分析,结果表明芒人患高TG 的人群携带HLA-B13 血清型、HLA-B*13:01 基因型的频率显著高于血脂正常组,HLA-B*40:02 基因型及HLA-B15 血清型频率显著低于正常组(P<0.05)。患高TC 的人群中HLA-B15 的频率明显高于正常组(P<0.05)。对于HLA-B13,有研究发现该血清型与骨肉瘤的不良预后[10]、强直性脊柱炎[11]相关,尤其是HLA-B*13:01已被确定为某些药物(卡马西平、氨苯砜、三氯乙烯)诱发超敏反应的标志[12-14]。也有HLA-B*40:02与再生障碍性贫血[15-16]、HLA-B15 与抗癫痫药物超敏反应相关联[17-18]的报道。尚未发现HLA-B13、HLA-B15、HLA-B40 和血脂异常相关研究。
本研究有关于高脂血症与HLA 的阳性发现,但由于样本量的限制,对于HLA-B13、HLA-B40 是否真的是罹患高TG 的危险因素,HLA-B15 是否为患高TG 的保护性因素以及患高TC 的危险因素尚不明确,还有待于扩大样本量进一步探讨。本研究不仅扩充了云南省边疆少数民族人群基因库,了解到该民族高脂血症的患病情况,而且也为边疆少数民族的慢性病防控和深入研究血脂异常与HLA 基因 分型的联系提供了宝贵的资料。
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【福生庄隧道坍塌处理方案】 福生庄隧道在哪里
(呼和浩特铁路局大包电气化改造工程指挥部,内蒙古呼和浩特010050)摘要:文章介绍了福生庄隧道
【学习心得体会】 日期:2020-03-05
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【学习心得体会】 日期:2022-12-07
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【学习心得体会】 日期:2022-10-09
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【培训心得体会】 日期:2022-09-24
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【学习心得体会】 日期:2022-08-31
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【学习心得体会】 日期:2022-10-31
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在2023年街道深化作风建设推动高质量发展走在前列动员会上的讲话同志们:今天我们召开“街道深化作风建设推动高质量发展走在前列动员会”,这次会议是街道三季度召开的第一场...
【军训心得体会】 日期:2024-03-17
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全面从严治党的心得体会800字7篇全面从严治党的心得体会800字篇1中国特色社会主义是我们党领导
【学习心得体会】 日期:2022-12-14
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【学习心得体会】 日期:2022-12-24
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2024年主题教育民主生活会批评与自我批评意见(38条)(范文推荐)
2023年主题教育民主生活会六个方面个人检视、相互批评意见:1 理论学习系统性不强。学习习近平新时代中国特色社会主义思想不深不透,泛泛而学的时候多,深学细照的时候少,特...
【邓小平理论】 日期:2024-03-19
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2024年交流发言:强化思想理论武装,增强奋进力量(完整)
习近平总书记指出:“一个民族要走在时代前列,就一刻不能没有理论思维,一刻不能没有思想指引。”党的十八大以来,伴随着新时代中国特色社会主义思想在实践中形成发展的历程...
【三个代表】 日期:2024-03-19
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2024年度镇年度县乡人大代表述职评议活动总结
xx镇20xx年县乡人大代表述职评议活动总结为响应县级人大常委会关于开展县乡两级人大代表述职评议活动,进一步激发代表履职活力,加强代表与人民群众的联系,提高依法履职水平...
【马克思主义】 日期:2024-03-19
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“千万工程”经验学习体会(研讨材料)
“千万工程”是总书记在浙江工作时亲自谋划、亲自部署、亲自推动的一项重大决策,也是习近平新时代中国特色社会主义思想在之江大地的生动实践。20年来,“千万工程”先后经历...
【三个代表】 日期:2024-03-19
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2024年在市政协机关工作总结会议上讲话
同志们:刚才,XX同志对市政协机关20XX年工作进行了很好的总结,很精炼,很到位,可以感受到去年机关工作确实可圈可点。XX同志宣读了表彰决定,机关优秀人员代表、先进集体代...
【邓小平理论】 日期:2024-03-18
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在全区防汛防涝动员暨河长制工作推进会上讲话提纲【完整版】
区长,各位领导,同志们:汛期已经来临,我区城区防涝工作面临强大考验,形势不容乐观。年初,区城区防涝排渍指挥部已经召开专题调度会,修订完善应急预案,建立网格化管理机...
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2024年镇作风整治工作实施方案(完整文档)
XX镇作风整治工作实施方案为深入贯彻落实党的二十大精神及省市区委深化作风建设的最新要求,突出重点推进干部效能提升,坚持不懈推动作风整治工作纵深发展,根据《关于印发《2...
【毛泽东思想】 日期:2024-03-18
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2024市优化法治化营商环境规范涉企行政执法实施方案【优秀范文】
xx市优化法治化营商环境规范涉企行政执法实施方案为持续优化法治化营商环境,激发市场主体活力和社会创造力,规范行政执法行为,创新行政执法方式,提升行政执法质效,着力解...
【毛泽东思想】 日期:2024-03-18
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2024年度关于开展新一轮思想状况摸底排查工作通知(完整)
关于开展新一轮思想状况摸底排查工作的通知为深入贯彻落实关于各地开展干部职工思想状况大摸底大排查情况上的批示要求和改革教育第二次调度会议精神,有针对性做好队伍教育管...
【三个代表】 日期:2024-03-18
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2024年公路养护中心主任典型事迹材料(完整文档)
“中心的工作就是心中的事业”——公路养护中心主任典型事迹材料**,男,1976年6月出生,1993年参加工作,2000年4月调入**区交通运输局工作,大学本科学历,中共党员,现任**...
【马克思主义】 日期:2024-03-17